Základní informace a pokyny pro pacienty viz LP kap. F. Pokyny pro pacienty.
Vyplnění požadavkového listu viz LP kap. C.04 Identifikace pacienta na žádance a označení vzorku.
Popis odběrových nádobek pro primární vzorky viz Příloha 3 LP Odběry a transport primárního biologického materiálu pro vyšetření prováděná na ÚLM-OKMI. V případě použití jiného odběrového systému musí odebírající personál zajistit, že se jedná o funkčně analogický prostředek tomu, který je uveden v Příloze 3 LP.
Typ primárního vzorku a množství, ze kterého je možné provést vyšetření je uveden v Příloze 5 LP Informace k vyšetřením ÚLM-OKMI.
Instrukce týkající se časových limitů pro požadování dodatečných analýz viz v Příloha 5 LP Informace k vyšetřením ÚLM-OKMI.
Každý vzorek zasílaný k laboratornímu vyšetření musí být opatřen žádankou. ÚLM-OKMI disponuje těmito žádankami:
Aktuální verze žádanek jsou dostupné v LN, intranetu Sharepoint FN Brno a na webu ÚLM-OKMI.
Pokud je do laboratoře od jednoho pacienta současně zasláno více odběrů a žádáno více vyšetření, je možné všechny požadavky o vyšetření označit na jedné žádance a to takovým způsobem, aby bylo možné přiřadit jednotlivá požadovaná vyšetření k jednotlivým materiálům.
Vyšetření vyžadující samostatnou žádanku: vyšetření hemokultury, moče, parazitologické vyšetření krve nebo stolice, vyšetření materiálů na STD, vyšetření na přítomnost Helicobacter pylori v žaludeční sliznici či ve stolici, vyšetření stolice na viry, vyšetření na dermatofyta, mykotických antigenů a stolice na obligátní střevní patogeny.
Pokud je (ve výjimečných opodstatněných případech) materiál zpracován přímo na klinickém pracovišti např. centrifugován, alikvotován, zamražen apod. je nutné tyto skutečnosti uvést na žádanku.
Statimová vyšetření jsou určena pro závažné stavy a akutní změny stavu nemocných, kdy výsledky mohou zásadním způsobem ovlivnit péči o ně.
Statimová vyšetření prováděná ve standardní pracovní době ÚLM-OKMI
Průkaz antigen S. pneumoniae v likvoru, čas odezvy 2 hod. dostupné 6:00-16:00 hod. v pracovní dny, 6:00-11:00 hod v mimopracovní dny.
Průkaz antigenu Legionella spp. v moči, čas odezvy 2 hod. dostupné 6:00-16:00 hod. v pracovní dny, 6:00-11:00 hod v mimopracovní dny.
Průkaz antigenu a toxinu C. difficile, čas odezvy 2 hod. dostupné 6:00-16:00 hod. v pracovní dny, 6:00-11:00 hod v mimopracovní dny.
Vyšetření prováděná v režimu STATIM jsou označena v příslušných žádankách, patologické nálezy jsou oznámeny telefonicky indikujícímu lékaři; čas odezvy 3 h dostupné v pracovní dny 7:00-14:30 hod. a mimopracovní dny 8-13:30 hod. Výsledky PCR metody v režimu STATIM jsou dostupné v den dodání vzorku do laboratoře.
Je nutné dbát na to, aby byl požadavkový list a vzorek identifikován shodnými identifikačními znaky (pacientovo jméno, rodné číslo/číslo pojištěnce).
Prostřednictvím jedné žádanky je možno žádat i o více než jedno vyšetření (mimo výjimek uvedených v kapitole C.02 Laboratorní příručky).
Všechny údaje na žádance musí být čitelné a přesné.
Při požadavku na doordinování vyšetření je nutno poslat žádanku s požadavkem.
Doba, po kterou je možné doordinovat vyšetření, je u každého vyšetření uvedena v Příloze 5 LP Informace k vyšetřením ÚLM-OKMI.
Provedení doordinovaného požadavku je možné, pokud je dostatečné množství vzorku, materiál odpovídá požadavkům pro daný vzorek a jsou splněna kritéria preanalytické fáze.
Ústní (telefonický) požadavek na doordinování materiálu lze přijmout, pokud z objektivních důvodů nelze ihned doručit žádanku.
Dodatečný požadavkový list musí být vždy po telefonickém objednání doručen do laboratoře.
Vydání validního výsledku laboratorního vyšetření začíná správným odběrem biologického vzorku a jeho správným transportem do laboratoře.
Při provádění odběru musíme zohledňovat několik aspektů. Důležitá je správná volba místa odběru (tam, kde právě probíhá infekční proces), správné načasování odběru (např. před podáním antibiotik), správná volba odběrové soupravy.
Zásadním požadavkem pro odběr biologického materiálu pro přímý průkaz (kultivace i molekulární detekce) patogenů vyšetření je zabránění kontaminace odebraného materiálu a tím tak vyloučení nebezpečí vydání falešně pozitivního nebo zkresleného výsledku.
Biologický materiál se odebírá do komerčně vyráběných odběrových souprav určených k jednotlivým druhům odběrů. Určitý speciální odběrový materiál je připravován laboratoří a je k dispozici k vyzvednutí na ÚLM-OKMI. Odběrový materiál vhodný pro jednotlivé typy vyšetření je podrobně popsán v Příloze 3 LP Odběry a transport primárního biologického materiálu pro vyšetření prováděná na ÚLM-OKMI.
V bakteriologii upřednostňujeme opakovaný odběr, čímž se zvýší pravděpodobnost záchytu infekčního agens.
Zásadním požadavkem pro odběr biologického materiálu pro mikrobiologická vyšetření je zabránění kontaminace odebraného materiálu a tím tak vyloučení nebezpečí vydání falešně pozitivního nebo zkresleného výsledku.
Důležité je správné načasování, tj. pokud možno před podáním antibiotik ev. před změnou ATB terapie. Pokud není možné takto postupovat, je nutné informaci o probíhající antimikrobiální terapii dodat do laboratoře spolu se vzorkem tj. uvést na požadavkový list.
Při požadavku na průkaz patogenu molekulární/PCR technikou je důležitá správná volba místa odběru a odebíraného materiálu vzhledem k požadovanému vyšetření. Vyšetření je možno provést z materiálu, který je i) relevantní pro průkaz daného patogena / skupiny patogenů, ii) diagnostická metoda je pro materiál zvalidována.
Podání antibiotik neovlivňuje PCR vyšetření. Překážkami pro relevantní PCR diagnostiku je i) přítomnost inhibitorů PCR v odebíraném materiálu, ii) degradace nukleových kyselin a iii) nedostatek materiálu, ve kterém je patogen (zpravidla vir) možné zachytit. Výsledek pak může být nevýtěžný ev. falešně negativní.
Pro detekci patogenů z krve je nutné používat antikoagulans EDTA, nikoli Li-heparin. Při provádění stěrů je nutné odebrat dostatek materiálu a to především, týká-li se požadované vyšetření intracelulárních patogenů.
Na degradaci nukleových kyselin jsou náchylnější viry než bakterie; více RNA viry než DNA viry. Obecně se degradaci předejde zchlazením vzorku na 2-8°C a pokud je prodleva mezi odběrem a dodáním vzorku do laboratoře řádově ve dnech, je vhodnější vyšetřovaný materiál zamrazit na -20°C; z plné krve před zamrazením separovat plazmu.
Pro průkaz protilátek v krvi se využívá zpravidla srážlivá krev a z ní separované sérum. Stejný výsledek poskytuje i plazma z krve odebrané do jakéhokoli běžného antikoagulans. Pro jedno stanovení je nutné počítat 0,5 ml krve + 0,5 ml krve jako mrtvý objem. Plnou krev je nutné dodat do laboratoře do 24 hod. od odběru. Separované sérum/plazmu uložené při teplotě 2- 8°C pak do 3 dnů. Separované sérum/plazmu uložené při teplotě -20°C a nižší je stabilní několik měsíců. Tohoto lze využít při vyšetření párových vzorků v infekční serologii. Zamraženou plnou krev nelze vyšetřit.
Při požadavku na vyšetření párových vzorů lze první odebraný vzorek (v akutní fázi onemocnění) odeslat do laboratoře ihned po odběru nebo až spolu se vzorkem s očekávanou sérokonverzí. V takovém případě je nutné jednoznačně na zkumavce identifikovat datum odběru, dodržet preanalytiku popsanou výše a uvést na žádanku, že se jedná o párové vzorky.
Při stanovení protilátek z likvoru či synoviální tekutiny je důležité zamezit příměsi krve, aby přítomnost protilátek v krvi falešně nezvyšovala výsledek. Makroskopicky zakrvácená tekutina je nevhodná pro vyšetření intratekální či intrasynoviální syntézy protilátek. Mikroskopicky zakrvácená tekutina (posoudí se v laboratoři stanovením koncentrace erytrocytů) může poskytnout informaci o nepřítomnosti protilátek, intratekální či intrasynoviální syntéza nemůže být potvrzena. Pro intratekální syntézu je nutné vyšetřit také sérum odebrané současně s odběrem likvoru.
Pro flowcytometrické vyšetření z periferní krve se vyšetřuje plná krev odebraná do K3EDTA s dodáním do laboratoře do 24 h od odběru.
Pro IGRA (interferon gamma release assay) se odebírá krev do Li-heparin bez gelu o dostatečném objemu tj. min. 5 ml.
Pro test aktivace bazofilů BAT a test fagocytární aktivity / oxidačního vzplanutí (Burst test) se odebírá krev do Li-heparin bez gelu.
Cílem je standardizovat přípravu nemocných před odběrem. Odstranit proměnlivé a ovlivnitelné biologické vlivy, zabránit možnosti kontaminace vzorku.
Pro bakteriologická vyšetření je velmi důležité zabránit kontaminaci vzorku, ať již mikroflórou pacienta nebo odebírajícího personálu.
Odběry pro bakteriologická vyšetření je vhodné provádět před nasazením antibiotik nebo před jejich změnou.
Pokud je potřeba zvláštní přípravy pacienta před odběrem na mikrobiologické vyšetření, je toto obsaženo v popisu takového vyšetření v Příloze 5 LP Informace k vyšetřením ÚLM-OKMI.
Postup odběru biologického materiálu pro jednotlivé typy vyšetření prováděných na OKMI je uveden v Příloze 3 LP Odběry a transport primárního biologického materiálu pro vyšetření prováděná na ÚLM-OKMI.
Odběr moče: po předchozím omytí nebo lépe dezinfekci zevního genitálu. Pro bakteriologické vyšetření je nejvhodnější střední proud ranní moče. Je možné odebírat moč z katetru, z epicystostomie, nefrostomie.
Výtěr z uretry: nejlépe ráno, pokud pacient ještě nemočil, nebo alespoň 3 hodiny po posledním vymočení.
Výtěr z krku: nejlépe ráno nalačno před ústní hygienou. Pacient by alespoň 2 hodiny před odběrem neměl jíst, pít, kouřit.
Sputum: sputum na průkaz infekce dýchacích cest odebíráme pokud možno ráno nalačno po provedení hygieny dutiny ústní, nebo po vypláchnutí dutiny ústní vodou.
Punkce: před provedením punkce je nutné místo, kde se punkce provádí dezinfikovat, dodržet dobu latence a na místo punkce již nesahat.
Krev na hemokultivaci: odběr provádíme vždy venepunkcí po předchozí dezinfekci. Odběr na hemokultivaci ze žilního katetru je nevhodný. Pokud je proveden odběr krve na hemokultivaci jinak než venepunkcí, je toto třeba uvést na žádanku. Odběr provedeme po době latence, která je nutná pro účinek dezinfekce. Místo odběru už nepalpujeme a provedeme odběr. Pracujeme asepticky. Bráníme přístupu vzduchu do lahvičky na anaerobní kultivaci.
Likvor: po předchozí dezinfekci odebíráme likvor lumbální punkcí, místo po dezinfekci již znovu nepalpujeme. Likvor je možné odebírat i ze zavedených cévek.
Odběr na dermatofyta: odebíráme šupiny kůže a kožní adnexa po dekontaminaci 10% etanolem, vždy z okrajů léze, kde je zánětlivý proces aktivní.
Odběr krve pro průkaz protilátek a pro buněčnou imunitu: před odběrem vynechat tučná jídla a netrpět žízní.
Obecné zásady strategie bezpečnosti práce s biologickým materiálem jsou obsaženy ve Vyhlášce Ministerstva zdravotnictví č. 195/2005 Sb., kterou se upravují Podmínky předcházení vzniku a šíření infekčních onemocnění a hygienické požadavky na provoz zdravotnických zařízení a ústavů sociální péče.
Na základě směrnice byly stanoveny zásady pro bezpečnost práce s biologickým materiálem:
Pro minimalizaci rizika je nutno dodržovat tyto hlavní zásady: udržování pořádku a čistoty na pracovišti, dodržování bezpečnostních předpisů, pokynů a opatření, dodržování předepsaných pracovních postupů.
ÚLM-OKMI a všechny spolupracující subjekty jsou povinny tyto pokyny aplikovat v plném rozsahu.
Odběrové nádoby s materiálem musí být doručeny do laboratoře bezprostředně po odběru. Není-li to možné, jsou vzorky uchovávány a transportovány dle určených teplotních podmínek, tak aby byla respektována stabilita vzorku vzhledem k požadovanému vyšetření viz Příloha 3 Odběry a transport primárního biologického materiálu pro vyšetření prováděná na ÚLM- OKMI a Příloha 5 LP Informace k vyšetřením ÚLM-OKMI.
Materiál je na ÚLM-OKMI doručen potrubní poštou, osobní donáškou, transportním vozidlem z ostatních pracovišť FN Brno, z externích pracovišť.
Vyšetřený biologický materiál se uchovává ve vyhrazených lednicích za teplotních podmínek a po dobu, která je uvedena v Příloze 5 LP Informace k vyšetřením ÚLM-OKMI.
Po uplynutí této lhůty se vyšetřený biologický materiál likviduje v souladu s předpisy FN Brno. Na IMM se likvory a punktáty po uzavření všech požadovaných vyšetření uchovávají při -20°C. Vzorky na imunopatologii se uchovávají při -20°C po dobu cca 3 měsíce. Veškeré nesrovnalosti týkající se odebraného materiálu nebo dokumentace řeší pracovník laboratoře ihned telefonicky se zdravotnickým personálem příslušného oddělení. Biologický materiál při transportu je nutné chránit před vysokou teplotou, zmrznutím, přímým světlem a zvýšenými otřesy. Transport vzorků musí být dostatečně rychlý, aby nedošlo ke znehodnocení.
Dodržení podmínek transportu je v příjmech materiálu ÚLM-OKMI kontrolováno a nedodržení může být důvodem pro odmítnutí vzorků k zpracování.
Mezi klinickými a laboratorními odděleními v dosahu potrubní pošty (PP) je využívána pro transport vzorků biologického materiálu „listovní větev“ PP. Vzorky jsou transportovány v obalu vloženém do speciální patrony. Z ostatních pracovišť je zajištěno doručení biologického materiálu donáškou.
|
|
Umístění |
PP č. |
Tel. |
Pracovní doba |
|
|
Všední den |
Víkend/ svátek |
||||
|
Bakteriologie |
Budova C, 1. patro |
2188 |
2176 |
6:00 – 16:00* |
6:00 – 11:30 |
|
Imunologie, molekulární mikrobiologie |
Budova F, přízemí vpravo |
3389 |
1529 |
6:00 – 16:00* |
8:00 – 13:00 |
* do 16:30 donáška
Převoz vzorků biologického materiálu k laboratornímu vyšetření mezi pracovišti FN Brno zajišťuje oddělení vnitroústavní dopravy transportním vozidlem. Vzorky, které nevyžadují speciální podmínky uchovávání, jsou uloženy do přenosných boxů. Vzorky jsou transportovány s příslušnou dokumentací, která je zabezpečená proti poškození (nepromokavý obal).
|
Pracoviště |
Příjezd/odjezd ÚLM OKMI |
|
Pracovní dny |
06:15 – 06:30 hod |
|
|
09:45 – 10:00 hod |
|
|
11:45 – 12:00 hod |
|
|
13:45 – 14:00 hod |
|
Dny pracovního volna |
09:45 – 10:00 hod |
Aktuálně platný časový harmonogram poskytuje Oddělení dopravy laboratořím a klinickým oddělením.
Převozy biologického materiálu mimo jízdní řád (urgentní vyšetření) lze objednat cestou dispečera dopravy tel. č. 532233300 v čase 06.00-14.30 hod. (nutno vystavit žádanku na přepravu s uvedením čísla nákladového střediska). Veškeré požadavky na odvoz biologického materiálu mimo pracovní dobu, (tj. ve všední dny od 15.00- 07.00 hod. a ve dnech pracovního klidu) se směřují na zaměstnance velínu (kl. 3000, kl. 2121, mob. 778 074 714).
Pokud není možné takto zajistit převoz, je možné využít vozidlo „akutní převoz krve“ TTO (Tkáňové a transfúzní oddělení) (kl. 2626 nebo 2545).
Pouze v případě, že ani tímto vozidlem není možno transport zajistit a/nebo se jedná o stav ohrožení života, je nutno zajistit přepravu vozidlem dopravní služby Meditrans (cestou pracovnic informací, kl . 3536, 2435). Pokud by nebylo toto vozidlo k dispozici, je nutné zajistit vozidlo RZP ZZS JmK dle Zákona č. 374/2011Sb.
Podrobné informace viz směrnice FN Brno „Transport vzorků biologického materiálu, transfuzních přípravků a krevních derivátů“ (S/FN Brno/1346).
Pokyny pro transportní službu:
Transport vzorků může provádět pouze zaškolený pracovník transportní služby. Musí dodržovat podmínky transportu, které mu pro konkrétní vzorek/vzorky určí pracovník laboratoře předávající vzorek. Podmínky transportu jsou dané v Laboratorní příručce ÚLM- OKMI. Vzorky jsou transportovány v oddělených boxech, které zaručují dodržení daných podmínek pro transport jednotlivých vzorků tj., separovaně jsou dopravovány vzorky v boxu při chladničkové teplotě, při laboratorní teplotě ev. vzorky zmražené.
